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作者: 深圳市中凈環(huán)球凈化科技有限公司發(fā)表時(shí)間:2020-12-04 18:11:56瀏覽量:1477【小中大】
基因工程凈化車間抗體的分離純化
抗體是一種特殊的蛋白質(zhì)分子,被用作體外診斷試劑、免疫親和層析的配基等,在生命科學(xué)研究、生物技術(shù)及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有廣泛應(yīng)用,尤其是抗體作為各種免疫分析的核心試劑,對(duì)免疫分析結(jié)果的靈敏度、特異性起著重要的作用;不論用什么方法產(chǎn)生抗體,都需要在后期對(duì)抗體進(jìn)行分離和純化,所以根據(jù)抗體,選擇合適的分離純化方式是十分重要的。
層析技術(shù)是抗體分離純化的核心技術(shù),一般采用三步純化策略:粗純、中間純化和精細(xì)純化,其中粗純主要目的是捕獲、濃縮和穩(wěn)定樣品,粗純一般使用蛋白A和蛋白G親和層析,并且一步即可達(dá)到95%以上的純度;中間純化和精細(xì)純化去除特定的雜質(zhì),如宿主蛋白、DNA、聚集體和變體等,常用的層析技術(shù)有離子交換、疏水層析等,從而達(dá)到最終治療用抗體所需的純度。用凝膠多慮純化抗體時(shí),將含有抗體的樣品通過(guò)裝有多孔性介質(zhì)填料的層析柱中,收集流出的抗體組分;當(dāng)樣品從層析柱的頂端向下運(yùn)動(dòng)時(shí),大的抗體分子不能進(jìn)入凝膠顆粒而迅速洗脫,小的抗體分子能夠進(jìn)入凝膠顆粒,其在凝膠柱中的遷移被延緩;抗體分子從凝膠過(guò)濾柱洗脫的先后順序一般是按照分子量的大小由高到低。中凈環(huán)球凈化可提基因工程車間、GMP車間的咨詢、規(guī)劃、設(shè)計(jì)、施工、安裝、改造等配套服務(wù)。
抗體或者抗體片段通常是從天然或重組體系中提取的,來(lái)源的選擇會(huì)影響到樣品處理和純化的步驟,因?yàn)椴煌瑏?lái)源的雜質(zhì)和需要的目標(biāo)分子純度是不同的,通常情況下,會(huì)選擇一個(gè)目標(biāo)分子高度親和的柱子并能夠一步得到高純度的樣品,且盡可能的減少污染;根據(jù)不同的目標(biāo)和條件,可以采用比較適宜的方法對(duì)所要制備的抗體進(jìn)行純化。
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